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Zoonoses短篇論著 | 恙蟲(chóng)病的分子診斷:樣品和時(shí)間問(wèn)題
作者:Nagarajan L Surya, Sania Paul, Susmitha K Perumall    來(lái)源:   時(shí)間:2024-01-23   訪(fǎng)問(wèn)量: 258  


近日,來(lái)自韋洛爾基督教醫(yī)學(xué)院Prakash JAJ等在Zoonoses發(fā)表題為《Molecular Diagnosis of Scrub Typhus: Sample and Timing Matter》的短篇論著。

恙蟲(chóng)病(ST)是一種由恙蟲(chóng)病東方體引起,再由恙螨傳播的人畜共患疾病。目前在除“恙蟲(chóng)病三角區(qū)”即南美洲(智利)、歐洲(法國(guó))、東非(肯尼亞)和迪拜外均已有報(bào)導(dǎo)[1]。恙蟲(chóng)病是一種急性發(fā)熱性疾病,其特征是螨蟲(chóng)叮咬部位出現(xiàn)焦痂[2],診斷特異性為99%[3]。但在無(wú)焦痂情況下,恙蟲(chóng)病的準(zhǔn)確診斷則需要借助實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)手段來(lái)實(shí)現(xiàn)與登革熱、鉤端螺旋體病、瘧疾和傷寒等疾病的區(qū)分[4,5]。常用于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的方法包括細(xì)胞培養(yǎng)、抗原檢測(cè)、核酸擴(kuò)增試驗(yàn)(NAATS)、免疫熒光試驗(yàn)(IFA)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。但恙蟲(chóng)病原體的隔離和免疫熒光試驗(yàn)的操作需要專(zhuān)業(yè)人員操作和設(shè)備,超出了大多數(shù)診斷中心的能力[3,6]。傳統(tǒng)PCR檢測(cè)方法操作過(guò)程易污染造成結(jié)果假陽(yáng)高。針對(duì)恙蟲(chóng)病原體56 kDa基因靶點(diǎn)的IgM 抗體ELISA檢測(cè)法,具有結(jié)果客觀、自動(dòng)化和敏感性,在常規(guī)診斷中更具可行性。qPCR在污染小的同時(shí)兼具檢測(cè)結(jié)果、特異性接近100%和定量分析等優(yōu)勢(shì)[7]。

本研究采用IgM ELISA和qPCR檢測(cè)法分別對(duì)284例急性未分化發(fā)熱性疾病的住院病人(IPs)的凝血樣本以及194例急性未分化發(fā)熱性疾病的門(mén)診病人(OPs)的全血樣本進(jìn)行恙蟲(chóng)病鑒定,評(píng)估了復(fù)合序列檢測(cè)在提高恙蟲(chóng)病診斷率中的參考價(jià)值。

研究標(biāo)準(zhǔn)和使用樣本數(shù)據(jù)表明:IP樣本存在5天以上的發(fā)燒情況;OP樣本存在3天以上的發(fā)燒情況。住院病患樣本中已有確診恙蟲(chóng)病陽(yáng)性116例,表現(xiàn)出焦痂63例。門(mén)診病患樣本中已有確診恙蟲(chóng)病陽(yáng)性122例,表現(xiàn)出焦痂71例。

IgM ELISA和qPCR法檢測(cè)284例IPs凝血樣本,結(jié)果顯示IgM ELISA法檢測(cè)104例真陽(yáng)性,2例假陽(yáng)性,166例真陰性,12例假陰性,靈敏度為89.6%,特異性為98.8%,準(zhǔn)確性為95.1%;qPCR法檢測(cè)43例真陽(yáng)性,168例真陰性,73例假陰性,靈敏度為37.1%,特異性為100%,準(zhǔn)確性為74.3%。

IgM ELISA和qPCR法檢測(cè)194例OPs全血樣本,結(jié)果顯示IgM ELISA法檢測(cè)89例真陽(yáng)性,1例假陽(yáng)性,71例真陰性,33例假陰性,靈敏度為73%,特異性為98.6%,準(zhǔn)確性為82.5%;qPCR法檢測(cè)80例真陽(yáng)性,72例真陰性,42例假陰性,靈敏度為65.6%,特異性為100%,準(zhǔn)確性為78.4%。

本研究中,IgM ELISA和47 kDa qPCR診斷恙蟲(chóng)病的靈敏度受采樣時(shí)間(≥5天/≥3天)以及樣本類(lèi)型(凝血樣本/全血樣本)的影響。其中IgM ELISA對(duì)IPs樣本(≥5天)的靈敏度高于OPs樣本(≥3天)且對(duì)凝血樣本靈敏度高于全血樣本。47 kDa qPCR對(duì)IPs樣本(≥5天)的靈敏度低于OPs樣本(≥3天)且對(duì)全血樣本靈敏度高于凝血樣本。因此、采用復(fù)合序列診斷方法提高恙蟲(chóng)病診斷率,對(duì)預(yù)后治療具有重要意義。

本中文評(píng)述由Zoonoses青年編委、軍事醫(yī)學(xué)研究院微生物流行病研究所肖瑞研究員提供,特此致謝!

Citation:

Surya NL, Paul S, Perumalla SK, Gunasekaran K, Abhilash KPP, Prakash JAJ. Molecular diagnosis of scrub typhus: Sample and timing matter. Zoonoses. 2024, 4(1): 4. DOI: 10.15212/ZOONOSES-2023-0019

原文鏈接:

https://www.scienceopen.com/hosted-document?doi=10.15212/ZOONOSES-2023-0019

 
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